如何建立標(biāo)準(zhǔn)的pcr實(shí)驗(yàn)室？ 如何設(shè)計(jì)和規(guī)劃pcr實(shí)驗(yàn)室？ 哪些功能模塊是必需的？

　　標(biāo)準(zhǔn)的pcr 實(shí)驗(yàn)室分為四個(gè)區(qū)域，分別為：

　　如果使用全自動(dòng)分析儀，則可以適當(dāng)組合區(qū)域。 （進(jìn)入每個(gè)工作區(qū)的方向必須嚴(yán)格一致。不同的工作區(qū)使用不同的工作服，例如不同的顏色。當(dāng)員工離開工作區(qū)時(shí)，不允許他們?nèi)〕龉ぷ鞣?。?/p>

　　pcr實(shí)驗(yàn)室平面布局長(zhǎng)這樣！ 【各區(qū)的功能分別為】

　　試劑準(zhǔn)備區(qū)：擴(kuò)增試劑的配制、分裝和保存。

　　樣品處理區(qū)：樣品登記、分裝；核酸提取、保存和加樣。

　　擴(kuò)增產(chǎn)物分析區(qū)：擴(kuò)增產(chǎn)物的測(cè)定、結(jié)果分析、登記及報(bào)告。

　　擴(kuò)增前區(qū)與擴(kuò)增后區(qū)應(yīng)嚴(yán)格分開，須使用不同的房間，兩區(qū)之間最好有一定的間隔。

　　使用商品化試劑盒可在樣品處理區(qū)進(jìn)行少量試劑配制。

　　在滿足下列操作和清潔處理要求的前提下樣品處理區(qū)和試劑準(zhǔn)備區(qū)可設(shè)在同一房間內(nèi)：

　　在生物安全柜內(nèi)操作；

　　每個(gè)實(shí)驗(yàn)人員、實(shí)驗(yàn)組分別使用各自的試劑及耗材；

　　盛放污染材料的器皿密封并一次性使用；

　　用有效的方法對(duì)操作區(qū)域和共享器具在實(shí)驗(yàn)前后進(jìn)行清潔及消毒。

　　pcr實(shí)驗(yàn)室建設(shè)規(guī)劃要點(diǎn)！

　　1、主體結(jié)構(gòu)：

　　主體為彩鋼板、鋁合金型材。室內(nèi)所有陰角、陽角均采用鋁合金50內(nèi)圓角鋁，從而解決容易污染、積塵、不易清掃等問題。結(jié)構(gòu)牢固，線條簡(jiǎn)明，美觀大方，密封性好。

　　2、標(biāo)準(zhǔn)的三區(qū)分隔和氣壓調(diào)節(jié)：

　　將pcr過程分成試劑準(zhǔn)備、標(biāo)本制備和pcr擴(kuò)增檢測(cè)三個(gè)獨(dú)立的實(shí)驗(yàn)區(qū)。整個(gè)區(qū)域有一個(gè)整體緩沖走廊。每個(gè)獨(dú)立實(shí)驗(yàn)區(qū)設(shè)置有緩沖區(qū)， 同時(shí)各區(qū)通過氣壓調(diào)節(jié)，使整個(gè)pcr實(shí)驗(yàn)過程中試劑和標(biāo)本免受氣溶膠的污染并降低擴(kuò)增產(chǎn)物對(duì)人員和環(huán)境的污染。

　　可打開緩沖區(qū)ⅰ，緩沖區(qū)ⅱ和 pcr 擴(kuò)增區(qū)的排風(fēng)扇往外排氣，在實(shí)驗(yàn)區(qū)的外墻上和各扇門上都安裝有風(fēng)量可調(diào)的回風(fēng)口，空氣通過回風(fēng)口向室內(nèi)換氣。

　　3、 消毒：

　　在三個(gè)實(shí)驗(yàn)區(qū)和三個(gè)緩沖區(qū)頂部以及傳送窗內(nèi)部安裝有紫外燈，供消毒用。

　　在試劑準(zhǔn)備區(qū)和標(biāo)本制備區(qū) 還設(shè)置移動(dòng)紫外線燈，對(duì)實(shí)驗(yàn)桌進(jìn)行局部消毒。

　　4、機(jī)械連鎖不銹鋼傳遞窗：

　　試劑和標(biāo)本通過機(jī)械連鎖不銹鋼（不建議使用電子連鎖方式）傳遞窗傳遞，保證試劑和標(biāo)本在傳遞過程中不受污染（人物分流）。

　　5、 地面

　　地面建議使用pvc卷材地面或自流坪地面，整體性好。便于進(jìn)行清掃，耐腐蝕。沒有條件的也可采用水磨石地面，或大塊的瓷磚（至少800mm×800mm）接縫需要小于2mm。

　　6、照明

　　燈具要選用凈化燈具，能達(dá)到便于清洗、不積塵的特點(diǎn)。

　　在建設(shè)的過程中應(yīng)注意：

　　●規(guī)范的安裝流程和全面的服務(wù)流程。

　　●嚴(yán)格按照規(guī)范科學(xué)設(shè)計(jì)的安裝流程。

　　●安裝前需要確定以下安裝條件，如：電源電壓，電源進(jìn)線位置，電話網(wǎng)絡(luò)線進(jìn)線位置，進(jìn)水水壓，最小安裝空間，地面平整度，通風(fēng)孔、進(jìn)水管和下水管的位置等，理想狀態(tài)的空間尺寸和通風(fēng)口尺寸。

　　設(shè)計(jì)要點(diǎn)

　　pcr實(shí)驗(yàn)室可以是分散形式，也可以是組合形式。 為了完成一組pcr實(shí)驗(yàn)，我們通常需要經(jīng)歷四個(gè)實(shí)驗(yàn)過程：試劑配制，樣品處理，核酸擴(kuò)增和產(chǎn)物分析。 如果實(shí)驗(yàn)過程需要，我們還應(yīng)該增加樣品粉碎過程。

　　一、分散形式pcr實(shí)驗(yàn)室

　　所謂分散形式pcr實(shí)驗(yàn)室，是指完成上述實(shí)驗(yàn)過程的實(shí)驗(yàn)用房彼此相距較遠(yuǎn)，呈分散布置形式。對(duì)于這種布置形式的pcr實(shí)驗(yàn)室，由于各個(gè)實(shí)驗(yàn)之間不易相互干擾，因此無需特殊條件要求。

　　所謂的分散式pcr實(shí)驗(yàn)室是指完成上述實(shí)驗(yàn)過程的實(shí)驗(yàn)室彼此之間相距很遠(yuǎn)，并且采用分散式布置的形式。 對(duì)于pcr實(shí)驗(yàn)室的這種安排，由于實(shí)驗(yàn)不容易相互干擾，因此不需要特殊條件。

　　二、組合形式pcr實(shí)驗(yàn)室

　　所謂組合式pcr實(shí)驗(yàn)室，是指將完成pcr四個(gè)實(shí)驗(yàn)過程的實(shí)驗(yàn)室彼此相鄰布置，形成一個(gè)獨(dú)立的實(shí)驗(yàn)區(qū)域的形式。 對(duì)于組合式pcr實(shí)驗(yàn)室，由于每個(gè)實(shí)驗(yàn)室的集中布置，容易造成相互干擾，因此對(duì)整體布局和屏障系統(tǒng)有一定要求。 每個(gè)房間的入口都設(shè)有緩沖室，以減少室內(nèi)和室外的空氣交換。

　　經(jīng)驗(yàn)：

　　試劑配制室及樣品處理室宜呈微正壓，以防外界含核酸氣溶膠的空氣進(jìn)入，造成污染；

　　可以通過控制進(jìn)風(fēng)風(fēng)量大于排風(fēng)風(fēng)量達(dá)到正壓效果。

　　核酸擴(kuò)增室及產(chǎn)物分析室應(yīng)呈微負(fù)壓，以防含核酸的氣溶膠擴(kuò)散出去污染試劑與樣品，可以通過控制排風(fēng)風(fēng)量大于進(jìn)風(fēng)風(fēng)量達(dá)到負(fù)壓效果。

　　在理想情況下，pcr實(shí)驗(yàn)室緩沖間內(nèi)，可設(shè)置正壓，使室內(nèi)空氣不流向室外，室外空氣不流向室內(nèi)。 pcr實(shí)驗(yàn)室進(jìn)風(fēng)由原有中央空調(diào)控制，要求將中央空調(diào)風(fēng)口安裝到指定定點(diǎn)，且高度為地面鋪裝好后2600mm處。

　　如果使用熒光pcr儀，擴(kuò)增室和產(chǎn)物分析室可以合并。

　　若房間進(jìn)深允許，可設(shè)pcr內(nèi)部專用走廊。需要指出的是在減少室內(nèi)外空氣交換方面，緩沖間比專用走廊更有意義。

　　各個(gè)區(qū)域之間應(yīng)具備單向的實(shí)驗(yàn)工藝流、物流、人流與氣流，形成單向流程的保護(hù)屏障，避免實(shí)驗(yàn)之間的相互干擾，防止核酸氣溶膠對(duì)實(shí)驗(yàn)過程造成污染產(chǎn)生假性結(jié)果。

　　實(shí)驗(yàn)室的墻體，包括頂棚，應(yīng)結(jié)構(gòu)牢固、氣密性好；所有陰角宜采用圓弧形線條過渡；墻體內(nèi)壁光潔、不吸附、耐腐蝕、易清洗消毒；地面材料應(yīng)滿足無縫隙、無滲漏、光潔、耐腐蝕的要求。

　　pcr實(shí)驗(yàn)室主要設(shè)備

　　試劑準(zhǔn)備區(qū)

　　儀器設(shè)備主要有冰箱、超凈臺(tái)、加樣器、混勻器、天平和離心機(jī)等，加樣器、天平除了要專用外，還應(yīng)有定期校準(zhǔn)。 試劑分裝應(yīng)在超凈臺(tái)中進(jìn)行 擴(kuò)增反應(yīng)混合液應(yīng)使用分子生物學(xué)級(jí)的，試劑制備好后應(yīng)有質(zhì)檢：一是否有污染、二是檢測(cè)試劑的擴(kuò)增效果。

　　標(biāo)本制備區(qū)

　　儀器設(shè)備主要有生物安全柜、加樣器、離心機(jī)、溫育儀、混勻器等

　　擴(kuò)增區(qū)

　　擴(kuò)增區(qū)的主要儀器是核酸擴(kuò)增儀、超凈臺(tái)、微量加樣器、離心機(jī)、可移動(dòng)紫外燈。擴(kuò)增儀需進(jìn)行校準(zhǔn)。并配備ups電源，以防止由于電壓的波動(dòng)，停電對(duì)擴(kuò)增效果的影響。

　　分析區(qū)

　　本區(qū)所使用的儀器設(shè)備有酶標(biāo)儀、洗板機(jī)、加樣器和水浴箱等 潔凈實(shí)驗(yàn)區(qū)的緩沖間部分面積不能超過主實(shí)驗(yàn)室的八分之一，這是有規(guī)定的。