潔凈室等級標(biāo)準(zhǔn)

　　潔凈室需要將一定范圍內(nèi)空氣中的微粒子、有害空氣、細(xì)菌等之污染物排除，并將無塵室內(nèi)溫度、潔凈度、室內(nèi)壓力、氣流速度與氣流分布、噪音振動及照明、靜電控制在某一需求范圍內(nèi)，通常根據(jù)實(shí)驗(yàn)室空氣中的顆粒數(shù)量，對潔凈室進(jìn)行分類。

　　潔凈室的分類根據(jù)國家不同有不同的等級規(guī)定，目前世界各國雖有自訂規(guī)格，但普遍還是采用美國聯(lián)邦標(biāo)準(zhǔn)【federal standard （fs） 209e, 1992】。

　　其中需要注意的，a、b、c、d級別的劃分是參照iso標(biāo)準(zhǔn)（歐盟采納的方式），其本身包含了靜態(tài)要求和動態(tài)要求。舊版gmp采納的是美國的潔凈間劃分方式，舊版的潔凈間劃分僅有靜態(tài)的概念，不要求動態(tài)。

　　在美國的聯(lián)邦標(biāo)準(zhǔn)209（a至d）中，在一立方英尺的空氣中測量等于或大于0.5mm的顆粒數(shù)，并且該計(jì)數(shù)用于對潔凈室進(jìn)行分類。該標(biāo)準(zhǔn)的最新209e版本也接受該度量標(biāo)準(zhǔn)。聯(lián)邦標(biāo)準(zhǔn)209e在國內(nèi)使用。較新的標(biāo)準(zhǔn)是國際標(biāo)準(zhǔn)組織的tc 209。

　　這兩個標(biāo)準(zhǔn)都根據(jù)實(shí)驗(yàn)室空氣中的顆粒數(shù)量對潔凈室進(jìn)行了分類。潔凈室分類標(biāo)準(zhǔn)fs 209e和iso 14644-1要求進(jìn)行特定的顆粒計(jì)數(shù)測量和計(jì)算，以對潔凈室或潔凈區(qū)域的清潔度水平進(jìn)行分類。

　　生物潔凈室潔凈度等級

　　潔凈室按空氣清潔程度分類，如果無塵室的等級只用塵粒數(shù)目來敘述，則可假設(shè)塵粒的尺寸為0.5μm，例如，1級、10級、例如100級無塵室最大塵埃粒子數(shù)目分別小于或等于1顆、10顆、100顆。如果塵粒尺寸不是0.5μm，無塵室等級應(yīng)以在一特定塵粒尺寸的級數(shù)來表示，分別分為1級、10級、100級、1000級、10000級、100000級，數(shù)值越小，凈化級別就越高。潔凈度越高造價就越高。

　　各行業(yè)對潔凈度等級的要求

　　各行業(yè)對潔凈室的凈化要求也有所不同：

　　1級：主要用于制造集成電路的微電子工業(yè)，對集成電路的精確要求為亞微米。10級：主要用于帶寬小于2微米的半導(dǎo)體工業(yè)。

　　100級：可用于醫(yī)藥工業(yè)的無菌制造工藝等。

　　1000級：主要用于高質(zhì)量光學(xué)產(chǎn)品的生產(chǎn)，還用于測試，裝配飛機(jī)蛇螺儀，裝配高質(zhì)微型軸承等。

　　10000級：主要用于液壓設(shè)備或氣壓設(shè)備的裝配，某些情況下也用于食品飲料工業(yè)，此外，萬級潔凈室在醫(yī)工業(yè)中也很常用。

　　100000級：十萬級潔凈室用于很多的工業(yè)部門，比如光學(xué)產(chǎn)品的制造，用于較小的元器件制造大型的電子系統(tǒng)，液壓或氣壓系統(tǒng)的制造，食品飲料的生產(chǎn)，醫(yī)、藥工業(yè)也常常使用。

　　標(biāo)準(zhǔn)的pcr 實(shí)驗(yàn)室分為四個區(qū)域，分別為：

　　n1.試劑配制區(qū)；

　　n2.樣品處理區(qū)；

　　n3.核酸擴(kuò)增區(qū)；

　　n4.產(chǎn)物分析區(qū)；

　　如使用全自動分析儀，區(qū)域可適當(dāng)合并。（進(jìn)入各工作區(qū)域必須嚴(yán)格按照單一方向進(jìn)行，不同的工作區(qū)域使用不同的工作服，例如不同的顏色。工作人員離開各工作區(qū)域時，不得將工作服帶出）

　　pcr實(shí)驗(yàn)室平面布局

　　【各區(qū)的功能分別為】

　　試劑準(zhǔn)備區(qū)：擴(kuò)增試劑的配制、分裝和保存。

　　樣品處理區(qū)：樣品登記、分裝；核酸提取、保存和加樣。

　　擴(kuò)增產(chǎn)物分析區(qū)：擴(kuò)增產(chǎn)物的測定、結(jié)果分析、登記及報告。

　　擴(kuò)增前區(qū)與擴(kuò)增后區(qū)應(yīng)嚴(yán)格分開，須使用不同的房間，兩區(qū)之間最好有一定的間隔。

　　使用商品化試劑盒可在樣品處理區(qū)進(jìn)行少量試劑配制。

　　在滿足下列操作和清潔處理要求的前提下樣品處理區(qū)和試劑準(zhǔn)備區(qū)可設(shè)在同一房間內(nèi)：

　　在生物安全柜內(nèi)操作；

　　每個實(shí)驗(yàn)人員、實(shí)驗(yàn)組分別使用各自的試劑及耗材；

　　盛放污染材料的器皿密封并一次性使用；

　　用有效的方法對操作區(qū)域和共享器具在實(shí)驗(yàn)前后進(jìn)行清潔及消毒。

　　pcr實(shí)驗(yàn)室建設(shè)規(guī)劃要點(diǎn)

　　1、主體結(jié)構(gòu)：

　　主體為彩鋼板、鋁合金型材。室內(nèi)所有陰角、陽角均采用鋁合金50內(nèi)圓角鋁，從而解決容易污染、積塵、不易清掃等問題。結(jié)構(gòu)牢固，線條簡明，美觀大方，密封性好。

　　2、標(biāo)準(zhǔn)的三區(qū)分隔和氣壓調(diào)節(jié)：

　　將pcr過程分成試劑準(zhǔn)備、標(biāo)本制備和pcr擴(kuò)增檢測三個獨(dú)立的實(shí)驗(yàn)區(qū)。整個區(qū)域有一個整體緩沖走廊。每個獨(dú)立實(shí)驗(yàn)區(qū)設(shè)置有緩沖區(qū)， 同時各區(qū)通過氣壓調(diào)節(jié)，使整個pcr實(shí)驗(yàn)過程中試劑和標(biāo)本免受氣溶膠的污染并降低擴(kuò)增產(chǎn)物對人員和環(huán)境的污染。

　　可打開緩沖區(qū)，緩沖區(qū)和 pcr 擴(kuò)增區(qū)的排風(fēng)扇往外排氣，在實(shí)驗(yàn)區(qū)的外墻上和各扇門上都安裝有風(fēng)量可調(diào)的回風(fēng)口，空氣通過回風(fēng)口向室內(nèi)換氣。

　　3、 消毒：

　　在三個實(shí)驗(yàn)區(qū)和三個緩沖區(qū)頂部以及傳送窗內(nèi)部安裝有紫外燈，供消毒用。

　　在試劑準(zhǔn)備區(qū)和標(biāo)本制備區(qū) 還設(shè)置移動紫外線燈，對實(shí)驗(yàn)桌進(jìn)行局部消毒。

　　4、機(jī)械連鎖不銹鋼傳遞窗：

　　試劑和標(biāo)本通過機(jī)械連鎖不銹鋼（不建議使用電子連鎖方式）傳遞窗傳遞，保證試劑和標(biāo)本在傳遞過程中不受污染（人物分流）

　　5、 地面

　　地面建議使用pvc卷材地面或自流坪地面，整體性好。便于進(jìn)行清掃，耐腐蝕。沒有條件的也可采用水磨石地面，或大塊的瓷磚（至少800mm×800mm）接縫需要小于2mm。

　　6、照明

　　燈具要選用凈化燈具，能達(dá)到便于清洗、不積塵的特點(diǎn)。

　　在建設(shè)的過程中應(yīng)注意

　　規(guī)范的安裝流程和全面的服務(wù)流程。

　　嚴(yán)格按照規(guī)范科學(xué)設(shè)計(jì)的安裝流程。

　　安裝前需要確定以下安裝條件，如：電源電壓，電源進(jìn)線位置，電話網(wǎng)絡(luò)線進(jìn)線位置，進(jìn)水水壓，最小安裝空間，地面平整度，通風(fēng)孔、進(jìn)水管和下水管的位置等，理想狀態(tài)的空間尺寸和通風(fēng)口尺寸。

　　pcr實(shí)驗(yàn)室設(shè)計(jì)要點(diǎn)

　　pcr實(shí)驗(yàn)室可以是分散形式，也可以是組合形式。完成一組pcr實(shí)驗(yàn)，通常應(yīng)經(jīng)過試劑配制、樣品處理、核酸擴(kuò)增及產(chǎn)物分析四個實(shí)驗(yàn)過程，若實(shí)驗(yàn)工藝需要，還應(yīng)增加樣品粉碎過程。

　　一、分散形式pcr實(shí)驗(yàn)室

　　所謂分散形式pcr實(shí)驗(yàn)室，是指完成上述實(shí)驗(yàn)過程的實(shí)驗(yàn)用房彼此相距較遠(yuǎn)，呈分散布置形式。對于這種布置形式的pcr實(shí)驗(yàn)室，由于各個實(shí)驗(yàn)之間不易相互干擾，因此無需特殊條件要求。

　　二、組合形式pcr實(shí)驗(yàn)室

　　所謂組合形式pcr實(shí)驗(yàn)室， 是指完成pcr四個實(shí)驗(yàn)過程的實(shí)驗(yàn)用房相鄰布置，組成獨(dú)立實(shí)驗(yàn)區(qū)域的形式。對于組合形式pcr實(shí)驗(yàn)室，由于各個實(shí)驗(yàn)間集中布置，容易造成相互干擾，因此，對總體布局以及屏障系統(tǒng)具有一定的要求。各室在入口處設(shè)緩沖間，以減少室內(nèi)外空氣交換。

　　一些經(jīng)驗(yàn)：

　　試劑配制室及樣品處理室宜呈微正壓，以防外界含核酸氣溶膠的空氣進(jìn)入，造成污染；

　　可以通過控制進(jìn)風(fēng)風(fēng)量大于排風(fēng)風(fēng)量達(dá)到正壓效果。

　　核酸擴(kuò)增室及產(chǎn)物分析室應(yīng)呈微負(fù)壓，以防含核酸的氣溶膠擴(kuò)散出去污染試劑與樣品，可以通過控制排風(fēng)風(fēng)量大于進(jìn)風(fēng)風(fēng)量達(dá)到負(fù)壓效果。

　　在理想情況下，pcr實(shí)驗(yàn)室緩沖間內(nèi)，可設(shè)置正壓，使室內(nèi)空氣不流向室外，室外空氣不流向室內(nèi)。pcr實(shí)驗(yàn)室進(jìn)風(fēng)由原有中央空調(diào)控制，要求將中央空調(diào)風(fēng)口安裝到指定定點(diǎn)，且高度為地面鋪裝好后2600mm處。